编者按: 2019年第八届李曼中国养猪大会于10月19-21日在郑州国际会展中心举办,以下是根据部分专家学术报告整理出的技术要点,与广大网友共享。 一、樊福好:猪唾液学监测的优势 非洲猪瘟疫情严重影响了我国的生猪生产和肉食供应,造成了养猪行业的极大灾难。纵其原因,虽然众说纷纭,但检测方法的失当是导致疫情泛滥的重要原因之一。据樊福好介绍,在正常生产情况下,病毒可能在1~2个月前就出现在唾液中了。因此,与血液检测相比,通过唾液检测,能够较早地发现猪只是否感染了病毒。 不仅如此,猪只感染ASFV后,首先出现在口腔中,时间可能长达2~3个月。“口腔内局部感染阶段是非洲猪瘟窗口期检测的重要时机,此时尚未形成病毒血症,积极采取措施还来得及。”樊福好表示,这也是实现传染病控制原则“早、快、严、小”的重要保证。 唾液样本的采集:获得新鲜的唾液(saliva)样本是准确诊断的前提条件之一/现行的鼻拭子(nasal swab)采样、口腔拭子(oral swab)采样以及肛门拭子(anal swab)采样存在样本陈旧、样本容易干燥、漏检率高等问题,已被逐渐淘汰。 唾液样本中的病原半衰期:唾液中含有丰富的具备活性的酶。机体健康状态不同,酶的含量也千差万别,从而导致唾液中的病原体半衰期(half-life period)长短不一,对于非洲猪瘟病毒来说,长者 2~3 天,短者 1~2 小时不等。病原半衰期的存在是导致唾液学非洲猪瘟病毒漏检率稍高的重要因素之一。 唾液样本的核酸保护:采集唾液样本之前加入适量的样本保护剂(Sample Protesis?),可以延长病原半衰期并保持唾液活性,含有保护液的唾液样本可以冷藏/冷冻运输及保存。 唾液样本的检测要求:采集的唾液样本要求清亮、透明并不得含有食物残渣,故采样之前的停食至关重要,原则上要求停食 12 小时以上。含有保护液的唾液中的核酸可以采用浓集法(concentration method)检测,即离心唾液,试管底部取样。 唾液样本检测对试剂盒的要求:由于口腔内的非洲猪瘟病毒感染往往处于初始阶段,病原核酸含量相对较低(CT 值在25~30 之间,未加保护液的唾液样本 CT 值往往在 32 以上),所以对非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒的敏感性要求较高,要求尽量能够实现单拷贝(single copy)检测。 阳性结果处置:对于唾液检测中非洲猪瘟阳性结果(+),存 在两种处置方案。一是严格剔除(“拔牙”,stamp out)阳性猪只,实现净化生产。二是控制阳性猪群的移动,尝试实施早期带毒生产(局部感染而非病毒血症),最终实现净化生产。 很多养猪科技工作者把带毒生产简单理解为血液中可以带毒是非常危险的,也是绝对禁止的。只有控制局部感染才有净化猪群,消除病毒携带状态的可能性。 二、闫之春:为什么新一代检测—剔除法控制非洲猪瘟正在中国取得成功? 非洲病毒正在众多中国猪群中得到清除:更对突如其来的ASFV,中国的养猪生产者从一开始的漠视,到后来的恐慌和极度恐慌:2019年来,主要从养猪公司最前线开始,逐步摸索出一套,识别发现、剔除控制的技术。2019年下半年,逐步发展到后来的一整套完整的。新一代检测剔除技术,结合不断升级的生物安全措施,已经开始可以在实际生产中有效地预防、控制、净化非瘟病毒。 面对ASFV的可选项 预防感染,阻止发病 能阻止猪群接触病毒 能阻止已接触病原的猪形成感染 控制感染,清除病毒:五原则 有高效、准确的鉴别诊断检测方法 病毒传播慢 能够有效阻止已感染猪的群内传播 环境污染不难清除 能够有效阻止新的感染 检测剔除,清除病毒的方法:遴选标准 高效且可靠的鉴别诊断方法 病毒自身特性:(场舍内)是否空气传播?(舍内)传播是否容易?
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