牛羊赤羽病研究进展

时间：2014-07-18 点击：次来源：阳光畜牧网作者：阳光畜牧网 - 小 + 大

    3 发病机理
    AKV的细胞受体在中枢神经系统[2]。AKV对神经元和星形神经胶质细胞易感，不感染小神经胶质细胞[3]。AKV在细胞培养物中还能引起被感染细胞的凋亡，可能与病毒的发病机理有关[4]。
    感染动物一般不表现临床症状。妊娠母畜感染AKV后随血流增殖，并持续存在于胎盘子叶的滋养层细胞、胎儿中枢神经系统和骨骼肌中未充分发育和分裂的细胞，导致坏死性脑脊髓炎和多发性肌炎。如果胎儿幸存下来，细胞的这些损伤就表现为关节弯曲、积水性无脑、脑穿通、脑过小、脑水肿、脑脊髓炎。由于胚胎期细胞比较脆弱，胚胎早期胎儿不具有免疫力，因此胚胎感染越早，对其损伤就越严重。如果是在细胞分化的器官形成期感染AKV，可完全阻断器官的发育成熟。在胚胎晚期感染AKV，将引起脑和脊髓的非化脓性炎症、早产、死产或流产，受感染的犊畜不能存活。感染的病毒病粒子或病毒抗原出现在胎牛的大脑，脊髓和骨骼肌。
    4 病理变化
    病理变化主要为先天性关节弯曲积水性无脑综合征(简称AH综合征)。病变特征与孕牛受感染的时间有关。怀孕3个月至4个月的母牛感染后出生的牛犊常出现无脑症病变，而关节弯曲常为孕牛在妊娠4个月至6个月时感染病毒所致。组织学检查胎儿呈现出非化脓性脑脊髓炎和多发性肌炎，流产或早产的胎儿病变最为严重，存活的胎儿则发生脑脊髓病变脑水肿或在神经内发生海绵样病变，脊髓腹角的运动细胞明显减少。
    AKV能实验感染啮齿类动物，成年鼠脑内接种可以发生致死性脑炎，腹腔内接种则无感染性，怀孕仓鼠接种可导致胎儿的致死性感染，出现死产；接种6日龄鸡胚卵黄囊或15日龄鸡胚静脉接种，则出现类似于牛羊AH综合症的病理学变化，脑新纹状体和视叶发生灶性炎性病变，脑缺损、积水、关节弯曲等，因此鸡胚可用作研究AKV的实用模型。
    5 抗原性
    在迄今分离到的AKV株中，没有发现有不同血清型存在。AKV与辛布群中的其他成员在交叉补体结合试验中表现有共同的群抗原，但在中和试验、血凝抑制试验和溶血抑制试验中具有很高的特异性，不出现交叉反应。
    AKV具有抗原多样性的特点，可能有不同的基因型，即AKV可能是一个由不同基因型构成的单基因库[57]。花群义等[8]根据SRNA的绘制了系统发育树，并将18株病毒分成3个族，证明AKV病毒以多谱系进化，也说明了抗原的多样性。
    6 诊断
    6.1 病原学诊断
    6.1.1 直接镜检　取病畜的血、肺、肝和脾及胎儿、胎盘和脑组织材料制成超薄切片负染，在电镜下检查病毒并观察其形态特征，病毒呈球形，直径80nm～120 nm，有囊膜。
    6.1.2 病毒分离鉴定　分离并鉴定病毒是最好的确诊方法。从成年动物分离病毒比较困难，因其缺乏临床症状，难于掌握病毒血症时期，通常从流产的胎儿和死胎中分离病毒。将胎儿的各种病料，特别是脑、脑室液、脊髓、肌肉、胎儿、胎盘以及肺、肝、脾等混合病料接种于乳鼠脑内或Vero、Hmlu1和BHK21等细胞，一般都易分离获得病毒。也可先接种鸡胚卵黄囊，再从病变鸡胚分离病毒。随后即可用特异免疫血清进行中和试验或补体结合试验等鉴定病毒。
    6.2 血清学诊断
    AKV与辛布群中的其他成员在交叉补体结合试验中表现有共同的群抗原，但在中和试验、血凝抑制试验和溶血抑制试验中具有很高的特异性，不出现交叉反应。
    6.2.1 琼脂凝胶扩散沉淀试验(ADIG)　是一种快速检测方法，能够检出Aino、Tinaroo和Peaton病毒抗体。刘焕章等[9]应用引自美国和日本的赤羽病病毒和标准阳性血清，制备了琼脂免疫扩散试验抗原和高免血清，建立了赤羽病琼脂免疫扩散试验诊断方法。此法操作简便，能很快得到试验结果，但不如中和试验敏感。
    6.2.2　血凝抑制试验(HI)　AKV能凝集雏鸡、鸽、鸭和鹅的红细胞，该凝集反应可被感染AKV的动物血清抑制。ItoH等[10]发现用甲醛处理过的鹅红细胞代替新鲜的鹅红细胞，能提高红细胞的凝集性，并且不依赖盐浓度，这样方便了对AKV的免疫学研究。抗凝剂肝素会抑制AKV的血凝活性，肝素结合AKV的血凝成分，而不是红细胞，所以，用肝素化的细胞分离AKV并不理想[11]。
    6.2.3　微量血清中和试验(SN)　康复动物及新生而未吃初乳的仔畜血清中存在能中和AKV的抗体。将已知AKV与可疑动物血清混合后接种于1日龄～2日龄小鼠脑内或7日龄～9日龄鸡胚的卵黄囊内，该试验也可在Vero、Hmlu1、BHK21细胞上进行。微量血清中和试验成功的关键是抗原的纯度和效价及标准阳性血清的质量。该法为目前我国进口种畜中AKV的主要检测方法，系农业行业标准。