某鸡场出现了大量病死蛋鸡,为了确诊,对临床上送检的45日龄左右患病蛋鸡进行了实验室检查包括病理解剖、粪便观察、PCR检测以及病毒分离等。最后确诊该批鸡是由 FAdV-Ⅰ和球虫混合感染而导致大量发病死亡的。 1、临床症状 某规模化鸡场 45 日龄左右的海兰褐蛋鸡群开始出现死亡,表现为零星死亡,随后死亡增加,日死亡率达 2%,病鸡精神沉郁,食欲差,鸡冠苍白,拉红色血便。采用双黄连口服液和地克珠利治疗,治疗效果不佳。 2、病理解剖 患病蛋鸡心包积液严重,心包中可见到大量的淡黄色的清亮液体,肝脏肿大,出血,质地脆弱易破裂,表面凹凸不平,坏死灶和出血交替出现,呈现黄黑相间。肾脏肿大、苍白,有尿酸盐沉积,盲肠内充满血液。 3、实验室诊断 病料来源于患病鸡,无菌剖检采集肝脏、心包积液等组织,加入的无菌PBS溶液,研磨后,-20℃保存;粪便采集新鲜血便。 3.1 粪便虫卵检查 取患病鸡新鲜粪便适量,加入饱和食盐水 50mL,搅拌后使用60目筛网过滤。将过滤液按照 3000r/min 离心10min,弃上清液,沉渣再加50mL饱和食盐水,静置 25min,蘸取表层液体置于载玻片上,盖上盖玻片,镜检。 3.2 病毒的检测 无菌采集病死蛋鸡的心包积液和肝脏,并提取组织总 DNA。以其为模板,进行 FAdV的常规 PCR扩增。 4、结果 4.1 粪便镜检结果 镜检可见一端稍尖,另一病料样品孔与心包中液体端钝圆呈现椭圆形或卵圆形的球虫卵囊。 4.2 病毒的检测及测序分析 PCR 电泳试验结果见图1,从图中可以看出,本次试验病料样品与心包积液PCR扩增产物与预期扩增产物片段大小相符,试验扩增产物的条带处于508bp,基因测序结果与 GenBank中的序列比对,并用 DNAStar 软件同源性分析,结果为分离株与禽腺病毒I群序列同源性为96.5%,表明病料样品中含有禽腺病毒Ⅰ群。 5、结论 禽腺病毒Ⅰ群主要引起鸡的包涵体肝炎、心包积水综合征的特异性病原体,其主要病变特征为心包中有淡黄色水样或胶冻样的积液,心脏松弛、柔软。肝脏呈现淡褐色和黄色,质地变脆,出现充血、肿胀,伴有局灶性坏死点和出血点。根据鸡群的临床症状、发病和病变特点、PCR 检测及目的基因测序结果,可以确诊该鸡群为 FAdV-Ⅰ与球虫混合感染。 禽腺病毒Ⅰ群一个条件致病性病毒,广泛存在于家禽的呼吸道和消化道,其发病往往伴随着其他不良因素如通风不良、饲料霉菌毒素超标;或者其他疾病如 IBD、CIAV、H9N2、NDV的发生。因此,在饲养过程中要注重家禽饲养管理,提高鸡体免疫功能,同时加强禽舍中的环境卫生,加强通风,合理消毒,并做好IBD、CIAV 等疾病的免疫工作,减少心包积液综合征。在治疗过程中,使用卵黄抗体,并结合保肝护肾的药物进行治疗,减少家禽的死亡,降低养殖经济损失。
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