有关禽流感免疫的几个技术问题

近年来，国外一些国家和地区，采取对家禽接种灭活疫苗而有效地预防了禽流感的发生。家禽接种禽流感疫苗是对禽流感较为有效的预防方法，但并不等于接种禽流感疫苗后就万事大吉、平安无事了。现就有关禽流感免疫的几个问题，谈谈个人的一些看法。

1 疫苗种类的选择

由于禽流感病毒易于变异，因而使用弱毒疫苗是非常危险的，因为活病毒随时可变异使毒力返强，因而接种活毒疫苗无疑是等于散布禽流感强毒，是危险和不可取的。

一些基因工程疫苗在实验室内有不同程度的免疫效果，但考虑到它的生物安全性，以及与由全颗粒病毒制成的灭活疫苗相比，其免疫效果仍有待提高和改进。毕竟动物体对禽流感病毒的免疫保护作用是由体内很多已知的和未知的、直接或间接的免疫保护因子协同完成的，而一些基因工程疫苗仅取其病毒的某一成分作为抗原，因而接种家禽后引起的免疫保护作用也许并不完全，效果也不一定很好，还需要进一步改进，才有实用性。

从实际效果、安全性能和经济实用性等方面综合考虑，灭活油乳剂疫苗还是比较可行的选择。在灭活疫苗的生产过程中，由强毒株病毒灭活后制成的疫苗的免疫效果往往比由弱毒株病毒制成的疫苗好，但考虑到用强毒病毒制造疫苗过程中存在对环境造成污染的危险性，因而实际选择就只能由弱毒禽流感病毒制成灭活油乳剂疫苗了。

2 疫苗亚型的选择

有些人想通过微大网方式拓宽免疫保护面，总是希望使用含禽流感病毒亚型更多一些的多价灭活油乳剂疫苗。值得商榷的是，从科学的角度看，在每一亚型绝对抗原量相同的条件下，注射一个亚型的禽流感灭活油乳剂疫苗（比如 H5），其免疫效果将优于同时接种含多个亚型（如H5、H7、H9）的疫苗。如果在生产灭活疫苗过程中，抗原未作浓缩，则单价疫苗中抗原的含量一般都比二价或三价疫苗为多，也就是说，使用单价疫苗对某一些相同亚型禽流感的保护作用就会优于使用多价疫苗。因此，在选择禽流感疫苗亚型时，最好了解当地或本场受禽流感威胁的是哪一个亚型，然后选择相同亚型的疫苗进行免疫接种；在环境复杂或不了解的情况下，可选择H5＋H9或其他必要亚型的二价或多价灭活疫苗。

3 禽流感疫苗与其他疫苗联合使用的选择

从试验中的试验数据来看，单一疫苗的免疫效果往往会比多联疫苗好，但是在实际应用中，为了减少免疫接种的次数，适当地使用一些多联疫苗还是可取的。但是也不能太多联，而且要保证重点，尤其是保证对新城疫和禽流感的免疫。原则上，禽流感疫苗最好单独使中，因为它本身可能已是多价的疫苗，如再与其他疫苗组联，可能会影响免疫效果。但对雏禽免疫接种，因接种量较小，可以考虑使用新城疫与禽流感H5＋H9疫苗的联苗，对较大日龄以后其它时间的免疫接种，禽流感疫苗还是单独接种为妥。

4 疫苗的接种时间和接种量

禽流感疫苗接种时间的安排与家禽饲养场有一定的关系，饲养期不超过7周的，由于接种疫苗后需15～20d后才能产生较好的保护作用，而雏禽由于免疫系统发育尚未成熟，接种疫苗诱导形成的保护作用较弱。因此，这些饲养期较短的家禽，接种疫苗的作用是有限的，如通过环境卫生的控制可以不接种的则不一定要接种，但如确实需要，可在10日龄左右接种一次。对于饲养期较长的家禽，为使禽群内的抗体水平较高和较均匀，在第一次免疫接种后，每隔2～3个月再接种一次较为合适。

接种量方面，20日龄以内雏鸡接种量为成鸡的50％左右，一般为0.25～0.3mL，往后每次接种0.5mL（指非浓缩抗原），成鹅接种量一般为鸡的2～3倍，成鸭的接种量一般为鸡的2倍。

5 免疫效果的监测和评估

接种疫苗后对免疫效果的监测，一般多采用血凝抑制试验（HI），具体操作方法参照新城疫抗体效价的监测方法。至于对免疫效果的评估，很难有一个统一的标准。比如说，同样的抗体滴度，在第一次免疫或第二次免疫后的效果就不一样，对同样的抗体液度在雏离与种禽之间、在健康禽群或有病禽群之间，其保护效果也是不尽相同的。而且，HI抗体只是机体多种免疫保护因素之一，它并不能完全代表离群的绝对免疫能力，它只是一个有参考意义的指标，所以在分析HI效价时，应结合本场和本人的经验、家禽的品种、近期环境卫生状况、季节和气温、免疫接种次数等综合分析，才能得到一个比较有参考意义的评估意见。

1:1024（相当于微量法10孔以上）。此外，还应注意均匀度问题。

6 免疫失败原因分析

接种疫苗是预防禽流感较为有效的方法，但却不是万能的方法。在一些地方（尤其是在冬季或环境受禽流感病毒污染较严重的地方），禽群接种疫苗后仍不时有离流感发生，原因是多方面的。

6.1 局部免疫力不足

由于禽流感一般提倡使用灭活疫苗，而不允许使用弱毒活疫苗。灭活疫苗更能较好地诱导家禽产生较高的循环抗体，形成较好的体液免疫保护，但由于缺乏活病毒颗粒在家禽上呼吸道、消化道、生殖道粘膜表面等部位的繁殖和刺激作用，以致家禽接种灭活疫苗后，在粘膜局部免疫方面未能形成有效的保护。

6.2 环境受禽流感病毒的严重污染

任何免疫接种形成的保护力都是相对的，而不是绝对的。无论从个体局部免疫力，或群体的抗体均匀度等考虑，按目前的实际操作而言，群体中经常还存在一些对禽流感敏感的个体。如果环境受禽流感病毒严重污染，强毒进入禽体内，则禽群中还会有离流感症状和病变的个体出现。如果禽群中抗体滴度偏低、均匀度差，则强毒可能在禽群中互相传播，最终有可能形成较典型的爆发。因此，我们经常强调：环境卫生是第一重要的防疫措施，加强生物安全措施，拒病毒于禽群之外，才是最有效的预防措施。

6.3 免疫接种的安排不恰当

为了方便而过分的使用多联疫苗或多价疫苗。须知在抗原浓缩的情况下，二联疫苗或二价疫苗所含的抗原量一般只有单联疫苗的50％，而三联疫苗或三价疫苗的每一种成分的抗原量只是单联或单价疫苗的33．33％。因而如过分地使用多联或多价疫苗，则免疫保护面是加宽了，但对某一特定的禽流感亚型而言，其免疫效果则打大折扣。

6.4 疫苗的质量问题

虽然每一种疫苗的生产均有一定的标准，但实际上，不同单位生产出来的疫苗，其质量仍有差异。例如，疫苗株免疫原性的差异、疫苗株在鸡胚中培养后获得HA滴度高低不同、加入的抗原量不同，以及疫苗其他理化性状的不同等。必须指出的是，并不是任何毒株都可以用来作为制造疫苗的种毒，而必须对众多的毒株进行实验室内和现场实验的比较，筛选出免疫原性好、培养后病毒滴度高、毒性低等各方面都比较优秀的毒株，只有经过这样严格筛选出来的病毒株才能用来生产疫苗。此外，还与乳化技术、矿物油质量有关。

6.5 其他问题

例如，在疫苗的运输和保管过程中，由于温度太低，疫苗被冻干或部分冻结。接种时连续注射器的操作失误，接种部位不正确，各种原因引起的漏接种，接种部位的污染等都可能使家离接种禽流感疫苗后失败或减效，从而达不到预期的免疫效果。