一例猪蓝耳病和副猪嗜血杆菌病混合感染的诊治

在现代畜牧业中，猪肉产业是全球农业经济中的一个重要组成部分，为人们提供了丰富的蛋白质来源。然而，猪病的暴发和传播一直是困扰养猪业的严重问题。猪蓝耳病（Porcine Blue Ear Disease，PED）和副猪嗜血杆菌病（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）是两种常见的猪病，它们分别由不同的致病微生物引起，但在一些情况下，这两种疾病可以同时感染同一头猪，形成混合感染。这种混合感染的病例对猪养殖业和畜牧学领域提出了严峻的挑战。当这两种病原体同时感染一头猪时，症状可能变得更加复杂和严重，增加了诊断和治疗的难度。本文综述了猪蓝耳病和副猪嗜血杆菌病混合感染的诊断和治疗策略，为兽医学界和养猪业提供有关处理这种混合感染的最新信息和指导。文章将讨论病原学特征、临床表现、诊断方法、治疗策略以及预防措施，以帮助兽医和养猪业者更好地应对这一问题，降低其对猪群健康和产量的负面影响。

1、病原特征    

猪蓝耳病和副猪嗜血杆菌病混合感染的病原特征涵盖了两种不同致病性微生物的特点。

猪蓝耳病主要由猪蓝耳病病毒引发，这是一种单股正义链RNA病毒。猪蓝耳病病毒在猪的小肠细胞内复制，导致肠道病变，表现为腹泻、呕吐和脱水。这一病毒对刚出生不久的仔猪特别具有致命性，因为它们的免疫系统尚未充分发育，易受感染。猪蓝耳病病毒的高度传染性使其在猪场内快速传播。副猪嗜血杆菌则是引起副猪嗜血杆菌病的致病菌，通常侵袭猪的呼吸道。副猪嗜血杆菌是革兰氏阴性细菌，其侵入性和毒力因子引起猪呼吸道感染，表现为呼吸急促、咳嗽、发烧和死亡。感染后，副猪嗜血杆菌可以迅速扩散，对整个猪群构成威胁。混合感染时，这两种病原体相互作用，增加了疾病的复杂性。猪蓝耳病病毒和副猪嗜血杆菌的共同存在导致更严重的临床症状，包括四肢肿胀、关节炎、心脏出血和腹膜炎。

2、临床表现    

感染初期，猪表现出腹泻和咳嗽，症状随疾病进展而加重，包括发烧、食欲、饮水和运动减少。这是由于猪蓝耳病病毒和副猪嗜血杆菌混合感染引起的，导致四肢肿胀，疾病严重时，甚至可能导致瘫痪。此外，感染猪可能出现心脏出血、积液，最终导致死亡。感染猪的外貌变化包括毛发粗乱，皮肤和眼结膜红肿、流泪，鼻孔分泌黄色黏液，耳尖和腹部皮肤发紫，伴随呼吸困难、咳嗽，体温升高至41℃。在后期，可观察到关节肿胀、跛行、坐姿和腹部呼吸。解剖检查显示心包和腹膜增厚，伴有混浊的黄色液体和黄色干酪状渗出物。肺部出现肿大、淤血或出血，肺间质增厚，大多与胸腔粘连，伴有黄色浆液性和纤维素性渗出物。心脏出现淤血，心包积液，心胞膜增厚，也可能与腹腔粘连。此外，脾脏肿大，伴有淤血和出血，质地脆弱易碎。

3、诊断方法    

3.1 实验室检测

3.1.1 方法

采集新鲜的肺脏、心脏、淋巴节点以及关节液作为实验室诊断的样本，确保采集的材料无菌。后使用以下培养基和试剂：胰蛋白大豆琼脂（TSA）、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）、胎牛血清、反转录试剂盒、PCR MasterMix、TriZol up、DNA Marker DL 2000以及各种生化试剂。引物合成了经典猪蓝耳病引物和特定的副猪嗜血杆菌引物，具体序列详见表1。处理方法是将肺脏、心脏、淋巴结样本分别取0.1 g，研磨成粉末后与TriZol up混合，然后进行氯仿萃取、乙醇沉淀等处理。使用PrimeScript™RT reagent Kit with gDNA Eraser对PRRSV核酸进行反转录操作。将采集的组织样本分别涂布于TSA培养基中，然后在CO2培养箱中倒置培养18 h。观察生长出的菌落，检查是否有类似副猪嗜血杆菌的特征，然后进行革兰氏染色。对疑似菌落进行生化试验，包括NAD补充培养等。用蒸馏水洗涤细菌菌落，然后提取DNA作为模板。对疾病进行PCR鉴定，使用合成的引物，扩增程序根据不同的病原体设定，然后进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。将分离出的副猪嗜血杆菌在TSA平皿上进行培养，然后贴上药敏试纸，根据抑菌圈的大小来确定其对不同抗生素的敏感性。

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