新流行非瘟疑难问题及分析

同时，可以认识到：

（1）自然缺失毒力大为减弱，感染猪临床无异常；（2）“常规的异常猪”检测手段，难以及时发现猪群已经感染。

（3）仅仅剔除异常猪不能快速及时净化。

4、是否采样方法/样品不对，导致难以发现抗原阳性猪？

通过弱毒场线栏位表面环境采样与血清采样的检测结果比较发现，弱毒场线栏位表面环境检测特异性高，敏感性低（阴性相符的特异性为95%，阳性相符的敏感性为25%）。为提高弱毒检出率，采用两次全群采血间筛查，可有效判断猪只是否处于阴性状态。血样仍是最适合的检测样本。

5、是否感染猪存在间歇性散毒，导致阳性猪有时成了阴性？

临床检测数据发现：

（1）弱毒感染猪血清持续阳性，但鼻拭子、肛拭子和咽拭子出现间歇性排毒情况，可以说明猪只是阳性但是咽拭子检测不到。

（2）同居猪的血清检出率较低，但是鼻拭子、咽拭子与攻毒猪也出现同样的病毒检出时间双峰，其原因可能是感染猪排毒时同居猪在摄入病毒。

弱毒的临床症状非常轻微，几乎所有样品中都存在间歇性排毒。单一样品、一次全检不一定能检出，因为每次全群检测时阳性猪不一定正在散毒。发现弱毒感染的场线，首次采样最好“咽拭子+血液”双来源，同时一个潜伏期内检测2次。

传统野毒与多毒力基因缺失的野毒株的感染，处置方法完全不同。发现阳性感染后，应尽快鉴定毒株类型，可大大节约检测与清除的资源，决定净化效果。

6、其他国家的是否也发现弱毒株？有基因变异吗？什么特点？

其他国家也有报道发现ASFV弱毒株，在波罗的海地区的爱沙尼亚，发现的弱毒株，其5’端MGF区存在缺失，3’端存在反转。使用发现的弱毒株，攻毒12头小型猪，5头家猪，5头野猪。结果，75%的小型猪和所有家猪均在出现急性症状后，存活了。但是所有野猪17天内陆续死亡。

弱毒株攻毒后，检测口咽拭子、肛拭子qPCR阳性出现的时间晚，持续时间短。

也有研究报道，在格鲁吉亚出现了新的、低毒力的毒株，这使得被动检测发现感染猪，变得更加困难。

三、总结

（1）2021年下半年开始，已发现多种非洲猪瘟田间毒株的基因组中，毒力基因出现多处缺失，致病性已经变异、变弱，防控形势正在发生重大变化。不再是“高致死力野毒＋人工缺失弱毒”并列，而是已经出现多种、多基因自然缺失的弱毒株，高致死力的野毒已经不再常见。

（2）各种受控试验和在我国的田间观察均发现，无论是强野毒、人工（单/双/多）缺失弱毒，还是自然大段缺失的弱毒，猪群均无法与之共存。弱毒感染猪，经过更长时间，均会出现严重的ASFV发病症状。

（3）通过“全群检测+精准清除”，均有成功净化的范例。“全群检测+精准清除”成功的关键是，确诊后24h内完成全群检测+离群。每晚一天都会付出超大代价。

（4）需尽快改进的方法：①尽早发现感染的快速方法；②快速全群检测的方法；③快速无污染将感染猪/接触猪隔离或离群的方法。

（5）中期看，有效预防、控制ASF，仍将是养猪业盈亏/存亡的不二法门。

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