近五年猪圆环病毒3型的研究进展

Zou等指出，在很大程度上人类仍未对B细胞反应进行探究，不过，利用免疫表位数据库分析资源预测了第93～103位、第109～146位和第170～181位氨基酸残基的免疫原性B细胞表位。为了进一步确定Cap蛋白中潜在免疫原性表位的特征，通过创建序列重叠区域显示，线性免疫原性B细胞表位位于第51～65位、第136～150位和第155～169位氨基酸残基。最小基序的氨基酸残基为第57～61位、第140～146位和第161～166位，这些氨基酸残基已被确定为进化过程中的保守表位序列。在多序列比对中，第57～61位和第161～166位氨基酸基序上均未发现氨基酸置换或间隙，表明PCV3流行株之间具有高度保守性。相比之下，在第140～146位氨基酸基序中，100个毒株中有1个在第140位氨基酸处出现了K到R的氨基酸置换，这意味着这些表位的保守性可能较低。有研究构建了三维模型，用于了解Cap蛋白的结构和组装成VLPs的过程。在PCV3 Cap单体中，所有确定的线性表位都暴露在病毒Cap蛋白表面。然而，当组装成VLPs时，表位第140～146位被包埋在内部，表明该表位位于Cap蛋白的内部。对实验早期产生的单克隆抗体进行筛选后发现，表位第140～146位占主导地位。这种对特定表位的优势抗体反应可能是“诱骗表位”的特征，在这种表位中，免疫系统产生的抗体几乎没有中和能力来降低病毒滴度。

5.3 细胞介导的免疫反应

PCV3感染后细胞介导的免疫反应尚不明确。研究表明，5周龄的CD/CD猪接种PCV3感染物质并用KLH刺激后，并没有产生明显的细胞反应。因此，在T细胞亚群中没有观察到差异，包括辅助性T细胞(CD4+ CD8+)、细胞毒性T细胞(CD4? CD8+高)、记忆性T细胞(CD4+ CD8+低)和调节性T细胞(CD4+ CD25+ Foxp3+)。这些结果与PCV2感染期间观察到的细胞反应形成鲜明对比，在PCV2感染期间，由于CD8+和CD4+CD8+双阳性T细胞群减少，淋巴细胞明显减少。实验性研究还表明，PCV3感染可降低植物血凝素刺激下的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)的增殖，导致淋巴细胞增殖减少。这种对植物血凝素(一种有丝分裂原)反应弱可能是因为T细胞无能。从感染PCV2的猪上分离到的PBMC中也观察到类似的反应，PBMC对超级抗原或有丝分裂原的反应较弱或无反应，降低了IL-4、IL-2和IFN-γ的水平。有趣的是，无论外周对PCV3的免疫反应如何，组织评估显示，淋巴细胞的大量涌入都与T细胞群有关，这意味着感染组织会发生T细胞群失衡，而不会转化为全身性变化。虽然PCV3最初与淋巴细胞耗竭有关，但现在已清楚，PCV3感染并不具有PCV2的大多数特征，如淋巴细胞减少、淋巴组织中组织细胞替代以及巨噬细胞和B细胞对病毒的吸收。总之，细胞反应的这些关键差异表明，PCV3对猪免疫系统的调节和功能的影响与PCV2的不同。

5.4 免疫逃逸策略

多项田间和实验性研究表明，PCV3感染的特点是病毒血症时间长。然而，尚未完全清楚允许病毒血症时间延长的免疫逃逸机制。一些体外研究证明，PCV3 Cap蛋白可抑制干扰素(interferon，IFN)-α和IFN-β的产生。在人胚肾细胞(human embryonic kidney cells 293T，HEK-293T)中，PCV3 Cap蛋白抑制了干扰素刺激反应元件(IFN-β-stimulated response element，ISRE)启动子的活性，表明Cap蛋白能抑制IFN信号。然而，该研究还表明，PCV3 Cap蛋白既不影响信号转导及转录激活蛋白(signal transducer and activator of transcription，STAT)1和STAT2的表达和磷酸化，也不影响IFNs转录和激活所必需的pSTAT1/pSTAT2的异源二聚化。此外，PCV3 Cap蛋白与核转运蛋白α1(karyopherin subunit alpha 1，KPAN1)的相互作用并不影响核转运活性。细胞质DNA传感器环磷酸鸟苷-磷酸腺苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase，cGAS)可识别外源DNA，并激活cGAS-STING通路，从而产生I型干扰素。此外，GTP酶激活蛋白(SH3结构域)结合蛋白1[GTPase-activating protein-(SH3domain)-binding protein 1，G3BP1]通过促进DNA结合和cGAS激活，可增强先天性抗病毒免疫反应。PCV3 Cap蛋白通过RGG结构域与G3BP1相互作用，抑制cGAS-STING信号，从而抑制DNA诱导的IFN-β mRNA转录和干扰素启动子的激活。这些研究表明，PCV3可调节I型干扰素反应，以逃逸宿主免疫反应。

自噬利用溶酶体和液泡来回收细胞成分，被认为是病毒用于增强复制和持久性的另一种机制。PCV2 Cap蛋白通过AMPK/ERK/TSC2/mTOR信号通路诱导完全自噬，使病毒能够通过自噬机制加强复制。研究表明，PCV3 Cap蛋白可在HEK-293T细胞中通过mTOR途径诱导自噬。Cap的表达导致磷酸化的mTOR含量降低，而mTOR的水平保持不变。此外，LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ的比率以及p62与β-肌动蛋白的比率的增加，也表明泛素-蛋白酶体途径可能有助于自噬。要确定PCV3 Cap蛋白和其他ORFs在猪细胞系和体内模型中诱导细胞凋亡和自噬的情况，还需要进一步的研究。

6 诊断

6.1 临床诊断

PCV3感染的最终临床结果仍存在疑问。最近发布的PCV3感染的病例定义有PCV3繁殖障碍和PCV3系统疾病。然而，除了多系统炎症外，这一新的病例定义提出的临床症状均未在实验性研究中重现。临床上，PCV3感染最常见的症状是母猪繁殖障碍和PDNS样病变，以及生长猪的多系统炎症。由于PCV3感染与其他猪病原体感染的临床表现相似和部分相同，仅凭临床症状确诊PCV3感染可能并不准确。因此，PCV3相关疾病(PCV3-associated disease，PCV3-AD)需要实验室支持。

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