鹅星状病毒病原学研究进展

感染鹅星状病毒的雏鹅，除了尿酸生成增多外，尿酸的排泄也出现障碍。排泄尿酸的主要器官是肾脏，其中发挥主要作用的转运蛋白有NaK-ATP泵和耐药相关蛋白4等。有研究报道，雏鹅感染鹅星状病毒后耐药相关蛋白4的表达量显著降低，Na-K-ATP泵的活性也会降低，这就使肾脏排泄尿酸的能力减弱[9]。更重要的一点是，雏鹅感染鹅星状病毒的主要靶器官为肾脏，该病毒侵入机体后对肾脏造成严重的病理损伤，并且当肾脏中有大量尿酸盐沉积时，这些结晶与巨噬细胞作用会激活机体内一系列的炎性因子，从而诱发肾脏严重的炎性损伤。这些均导致肾脏对尿酸的排泄能力下降。

5 检测方法

5.1 病毒分离鉴定

病毒分离鉴定为最传统的检测方法，虽检测时间较长及成本较高，但对于很多传染病的检测却是金标准。采集具有典型症状的发病雏鹅脾脏、肝脏和肾脏等组织，将组织放入研钵中一边加入缓冲液一边进行研磨，收集研磨后的液体反复冻融，离心收集上清液用以接种鹅胚进行传代培养，除鹅胚外也可用相应的细胞进行病毒分离。已有很多研究团队通过传代培养分离出鹅星状病毒，并通过动物致病性试验，若症状与发病雏鹅相同[10,11]，即确诊为鹅星状病毒感染。

5.2 电镜观察

电镜观察是检测病毒最直接的方法之一，分离纯化后的病毒用电镜观察，观察到形态为星形且大小在28～30 nm的病毒粒子即可确诊，但也有研究发现，病鹅肝脏内的病毒粒子为30 nm，但并未见星状形态[12]。所以该方法对病原检测的特异性还有所欠缺，可作为其它方法的辅助检测技术。

5.3 分子生物学检测方法

分子生物学检测方法可对病原进行快速、准确的检测。杨颖等[13]根据鹅星状病毒变异株的ORF1a基因和新型鹅星状病毒的ORF2基因设计特异性引物，建立了可同时检测2种鹅星状病毒的RT-PCR检测方法，具有较好的灵敏度，最低检测量分别为1.70×103拷贝/μL和1.71×103拷贝/μL，与其它病毒无交叉反应。马水峰等[14]根据新型鹅星状病毒的ORF2基因设计特异性引物，建立了新型鹅星状病毒荧光定量PCR方法，检测灵敏度为1.087×101拷贝/μL，灵敏度高，与其它病毒无交叉反应。曾杏梅[15]根据鹅星状病毒ORF2基因设计环介导等温扩增引物，建立了鹅星状病毒LAMP检测方法，反应温度为58℃，反应时间为40 min，最低检测浓度为1×10-14μg/μL病毒核酸，与其它鹅源病毒无交叉反应。

5.4 免疫学检测方法

目前已有学者制备出鹅星状病毒的单克隆抗体及多克隆抗体[16,17]。佟贺等[18]通过大肠杆菌表达鹅星状病毒1型衣壳蛋白VP70，以此包被酶标板，建立检测鹅星状病毒1型抗体的间接ELISA，此方法可特异敏感地检测出鹅星状病毒1型。免疫学检测方法的建立非常重要，如ELISA方法可检测血清中抗体，可用于鹅星状病毒的流行病学调查，也可监测疫苗的免疫效果。

6 小结

近几年，我国多省养鹅地区暴发鹅星状病毒病，目前尚无商品化疫苗对该病进行预防，对我国养鹅业造成巨大经济损失。我国现流行的Go Ast V分为两个基因型组群，存在着遗传多样性，且随时可能进一步突变。关于鹅星状病毒感染导致雏鹅痛风的致病机制并不完全清楚，病毒编码的某些结构蛋白和非结构蛋白，对于感染宿主细胞的功能和作用尚不明确，需要进一步的研究。

【参考文献】略

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