时间:2022-11-17 点击: 次 来源:猪业科学 作者:姜鑫,范学伟 - 小 + 大
近年来,全国各地猪场不同程度暴发产房仔猪病毒性腹泻,给猪场造成的损失巨大,特别是规模化猪场损失更是惨重。本研究团队选择黑龙江省暴发产房仔猪腹泻猪场进行调查与分析,选择发病猪场外引后备猪、场内的基础母猪和育肥猪三个群体对其分泌物进行病原检测追踪,探明猪场内部猪群PEDV、TGEV、GARV带毒和排毒状况,明确猪场腹泻感染源头和感染途径,为猪场防控新生仔猪病毒性腹泻提供参考依据。 1 猪群调查 1.1 材料与方法 对猪场后备母猪、基础母猪、育肥猪3个群体分别选取50头采集口鼻拭子、肛门拭子。将口鼻拭子、肛门拭子群内混样,5头混成1个检测样本,每个群体制作成10份混样,总计30份混样。采用实时荧光定量PCR检测方法对30份混样进行核酸检测。 1.2 RNA提取 利用核酸提取试剂盒对30份样品进行RNA核酸提取,分别获得50μL核酸模板。 1.3 PEDV/GARV/TGEV核酸检测 取PEDV/GARV/TGEV检测试剂盒,解冻,离心,扩增。设置扩增程序如表1。
结果判定:被检测样品检测结果中FAM通道Ct值≤40,扩增曲线为典型的S型扩增曲线,且ROX内标通道Ct值≤35,报告PEDV核酸阳性;被检测样品检测结果中HEX通道Ct值≤40,扩增曲线为典型的S型扩增曲线,且ROX内标通道Ct值≤35,报告GARV核酸阳性;被检测样品检测结果中CY5通道Ct值≤40,扩增曲线为典型的S型扩增曲线,且ROX内标通道Ct值≤35,报告TGEV核酸阳性。 1.4 检测结果 检测结果见表2。
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