羊梅迪-维斯纳病的诊断

1  流行病学

该病的传播为水平传播，其传播途径为消化道和呼吸道。乳腺和肺脏是病毒排出的主要通道。实验观察发现，在梅迪-维斯纳病发病率高的羊圈内出生的羔羊，于出生当时及出生后10小时、6周和1年后隔离，然后观察8年，结果于出生当时被隔离的羔羊未观察到感染，而其他3群分别有28%、75%和81%出现症状。在感染双亲的羊圈内生活的时间越长，发病率越高，病情越严重。该病也可经呼吸道的飞沫传播，摄入被病毒污染的牧草也可引起感染。羊的性别和年龄对该病的易感性无直接影响。易感绵羊经肺内注射病羊的肺细胞和分泌物也能实验性地传播该病。

2  临床症状

该病的潜伏期通常在2~3年以上。病羊首先表现为掉群，同时出现干咳并逐渐消瘦，呼吸困难日益明显，病情进行性加重，直到死亡。维斯纳病病羊最初表现为步样异常、运动失调和轻瘫，尤其是后肢更为明显。有时可见头部呈异常姿态，唇或颜面肌震颤。病情缓慢增进和恶化，最后陷入对称性麻痹而死亡。

3  病理学诊断

（1）病理剖检变化。梅迪病病羊除明显消瘦外，病变主要出现于肺及局部淋巴结。剖检可见肺明显膨大，肺的体积和重量比正常肺大2~4倍，肺和胸壁之间发生粘连，胸膜和肺质地变硬呈棕色或暗红色，触之有橡皮样感。肺小叶间质明显增宽。肺切面干燥，透过浆膜可见到大量粟粒状灰色小点。纵膈淋巴结和支气管淋巴结肿大和水肿。患维斯纳病的羊，一般无眼观变化，老龄羊的后肢骨骼肌显著萎缩，少数病例脑膜轻度充血，或脑、脊髓切面有小的黄色斑点。关节的病变主要为滑液囊膜和黏液囊膜增生，关节囊纤维化及关节软骨和骨变性，发病关节的关节面干燥，有纤维蛋白沉着。乳房有硬节。

（2）病理组织学变化。主要病变是间质性肺炎，在血管周围、支气管周围或肺泡之间有淋巴样细胞、单核细胞、巨噬细胞呈弥漫性浸润，伴有肺泡壁肥厚和淋巴样细胞呈结节状集聚。维斯纳病的初期病变呈弥漫性脑脊髓炎，可见淋巴样细胞或小胶质细胞增生、浸润或围管性细胞浸润。早期在神经组织见有星形胶质细胞环绕血管的病灶，随着病程发展，病灶融合成片，边缘密度增强而中心则形成微小的空泡。病变从初期的室管膜下广泛地蔓延到脑和脊髓实质。继而小脑、大脑、脑桥、延脑和脊髓等的白质呈弥漫性脱鞘。

4  病原学诊断

（1）病料的采集和处理。无菌采集潜伏期和发病期病羊的脉络丛、脾、纵膈淋巴结、唾液腺、肺、血液及脑脊髓液进行病毒分离培养和动物感染试验。

（2）分离培养。梅迪-维斯纳病毒可以在绵羊的室管膜脉络丛、肾、唾液腺和绵羊胎肺的原代、继代和传代细胞培养物内增殖，其中以来源于绵羊室管膜脉络丛细胞和绵羊胎肺细胞最常用。将无菌或除菌后的病料接种于细胞培养物内，在2~3周内产生细胞病变，形成巨大的合胞体细胞（也称多核巨细胞、融合细胞），每个合胞体细胞中含有2~20个细胞核，以合胞体细胞为中心，周围是折光性强的梭形细胞。病变细胞最后崩解。经过连续传代后，致细胞病变的时间可缩短到培养的第3~15天。经细胞培养传代的病毒对羊仍有致病力。

（3）动物回归试验。梅迪病采集病羊的肺制成悬液，经鼻内、胸腔或静脉接种易感绵羊，1个月后扑杀检查，感染羊的肺出现梅迪病的病变。维斯纳病采集病羊组织制成悬液，经脑内接种易感绵羊，1个月内感染羊的脑脊髓液中淋巴细胞增多，表现出维斯纳病的神经症状或病理组织学变化。用梅迪病毒感染山羊，出现脑炎、关节炎和间质性进行性肺炎，并检出抗体。

（4）电子显微镜检查。采取病羊的病变肺组织作超薄切片电镜直接镜检，或将肺组织制成乳剂后经差速离心处理，再以硫酸镁或聚乙二醇浓缩，并通过柱层析提纯后，用磷钨酸负染。在电镜下观察病毒颗粒的形态特征。成熟的梅迪-维斯纳病毒呈球形，直径为90~100nm。病毒核心致密，直径为30~40nm。用感染细胞培养物做超薄切片电镜观察，在感染细胞的周围可见典型的病毒颗粒，呈球形，直径约95nm，内有2个或多个核芯，其绝大多数为圆形，少数为杆形或锥形。并可看到病毒粒子从感染细胞的细胞膜上释放。

5  血清学诊断

已报道的血清学方法有中和试验、补体结合试验、被动血凝试验、荧光抗体试验、免疫扩散及酶联免疫测定法等。以感染的细胞培养物作为抗原，用补体结合试验和中和试验可检测出病羊血清中的抗体。补体结合抗体于感染后3~4周可被检出，中和抗体在感染后第2~3个月可被检出，均能持续数年。为了确定该病在畜群中的存在，可以应用免疫扩散试验，但对单个动物的确诊，应联合使用上述3种方法中的至少2种。目前，广泛应用免疫扩散试验对羊群进行监测。