程果 苗连叶(河南省动物疫病预防控制中心 郑州) 一、血清学检测技术原理 由于病原微生物(细菌、病毒及其他微生物)均可以刺激机体产生相应的抗体,而且这种抗体与其相应的抗原可发生特异性反应,所以在临床上根据这一原理,可利用已知抗原来鉴定病畜血液中相应的抗体,或特异性诊断血清(己知抗体)来鉴定其相应的病原体(抗原),生产中用于检测抗体的比较多一些。 二、血清学检测的类型 根据抗原与抗体特异性结合产生的现象和结果,血清学反应分五种类型:凝集反应、沉淀反应、补体结合反应、标记抗体反应(包括荧光抗体,酶标抗体,放射性标记抗体、发光标记抗体等)、中和反应。 血清学检测在猪病防控中的常用类型: 猪瘟:正向间接血凝实验和阻断ELISA,检测母源抗体滴度和免疫效果;ELISA检测野毒感染(抗凝血)。 猪伪狂犬:如gG和gE鉴别ELISA,筛选ELISA,乳胶凝集试验检测猪群免疫抗体转阳率。 猪蓝耳病:ELISA,主要通过S/P值分析猪群抗体水平的稳定性以及猪群的健康状况。 口蹄疫:正向间接血凝、液相阻断ELISA、VPI结构蛋白ELISA、非结构蛋白3ABC--ELISA 了解猪群抗体水平,区分免疫抗体与野毒感染抗体。正向间接血凝试验的抗体效价大于等于25判定为免疫合格,液相阻断ELISA的抗体效价大于等于26判定为免疫合格,VPI结构蛋自ELISA的抗体效价大于等于25判定为免疫合格。 猪圆环病毒病:间接ELISA用于分析猪群的感染状况。 猪喘气病:ELISA适用于所有血清型的抗体检测。 猪细小病毒:乳胶凝集。 猪衣原体:正向间接血凝。 猪乙型脑炎:乳胶凝集。 猪弓形体:正向间接血凝。 猪传染性脚膜肺炎:正向问接血凝。 布鲁氏菌:虎红平板凝集、试管凝集。 三、血清学检测技术在猪病防控中的作用 1、对诊断疫病提供参考 (1)末吃初乳仔猪的抗体情况:如果某种疫病的抗体是阳性或有某种疫病的抗体,则可提示有该种疫病的感染。 (2)相同免疫背景、相同日龄的猪群某种疫病的抗体水平参差不齐。则可提示有该种疫病的感染。 (3)采集哺乳母猪及其哺乳仔猪的血清同时进行某种疫病的抗体检测,如果某头哺乳仔猪的抗体水平比哺乳母猪的抗体水平高,则可提示该头哺乳仔猪有这种疫病的感染。 (4)某种疫病抗体水平的异常变化 ①发病前后抗体的异常变化:分别采集发病时和发病15天左右的血清进行抗体检测,如果发病15天左右的抗体水平升高,则可提示有该种及病的感染。 ②异于抗体消长规律的抗体变化:经常进行抗体监测的养殖场,如果抗体突然转阳或抗体突然升高(免疫后抗体上升阶段除外),则可提示有该种疫病的感染。不经常进行抗体监测的养殖场,根据抗体消长规律来判断。例如:某群育肥猪免疫猪蓝耳病疫苗已经3个月以上,抗体水平应该下降或转阴,如果抗体水平依然很高,且抗体水平参差不齐,则可判断该猪群有蓝耳病的感染。
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