猪支原体肺炎(MPS)是由猪肺炎支原体(MH)引起的猪的一种慢性、接触性呼吸道传染病,以咳嗽、气喘、生长缓慢为特征,在世界范围内广泛流行,主要通过鼻腔接触和空气传播。病猪表现为咳嗽和气喘,肺部肉样或肝样病变。患有该病的慢性病猪,易诱发其它呼吸道疾病,增加病死率,并且该病一旦传入猪群,很难彻底清除。病猪日增重降低约17.4%,饲料转化率降低约14%。在德国汉堡召开的第18届IPVS(世界猪病大会)上发表的资料表明,猪肺炎支原体是猪呼吸道病综合征(PRDC)的主要病原体之一,阳性率达82.5%。山西昼夜温差大,环境污染严重,饲养条件不好,使该病成为常见病、多发病,严重危害养猪业的发展。本病是高发病低死亡,其防治不被养猪业者重视。笔者于2009年4—7月对猪支原体肺炎在山西省的流行情况进行了流行病学调研,现将结果总结如下。 1 材料与方法 1.1流行病学调查方法 笔者对太原、晋中、阳泉、长治、忻州、原平等地市10个饲养100头母猪以上规模的种猪场、饲养30头母猪以下规模的散养户、门诊病例及3个屠宰场进行调研。调研内容:没有免疫过猪肺炎支原体疫苗的猪群是否有咳嗽、气喘、生长速度降低症状及屠宰后肺部病变,对疑似感染猪及屠宰时肺部有病变的猪采集病料检测病原,对非免疫猪群采集血样检测抗体,并做好详细记录。 1.2病原、抗体检测材料及检测方法 1.2.1检测材料对有呼吸道症状的疑似感染猪肺炎支原体母猪、仔猪、肥育猪每头活体采血5 mL,用鼻拭子采集呼吸道分泌物;对屠宰场和门诊病例肺部有病变的猪采集支气管和有病变的肺部组织,用咽拭子采集呼吸道分泌物,放-70℃冰箱保存备用。对非免疫猪每头采血3-5 mL。 1.2.2检测试剂猪肺炎支原体PCR检测试剂盒与猪肺炎支原体血清抗体ELISA检测试剂盒由北京索奥生物医药科技有限公司提供。 1.2.3实验仪器PCR仪、低温高速冷冻离心机、电泳仪、紫外线凝胶成像仪、酶标仪、洗板机等。 1.2.4病原检测方法按照猪肺炎支原体PCR检测试剂盒的操作步骤进行:样品处理(组织样品处理、全血样品处理、阳性对照处理、阴性对照处理)→DNA的提取→PCR扩增→电泳→凝胶成像→拍照→结果判定。紫外线灯下观察,在阳性对照出现187 bp扩增条带、阴性对照无条带出现时,实验结果成立。被检样品出现187 bp扩增条带为猪肺炎支原体阳性,否则为阴性。 1.2.5抗体检测方法按照猪肺炎支原体血清抗体ELISA检测试剂盒操作步骤进行:全血样品处理→稀释血清→加样→洗板→加酶结合物→洗板→显色→终止→酶标仪判定。空白孔调零,在酶标仪上测各孔的OD630值。若样品OD630≥0.42,判为阳性;若 样品OD630<0.38,判为阴性;若样品0.38≤OD630<0.42,判为可疑,建议重新检测,若重复检测结果仍在0.38~0.42,判为阳性。 2 结果 2.1流行病学调研情况 2.1.1流行特点笔者调查发现,该病一年四季均可发生,但寒冷、气候多变的季节多发;塑料大棚饲养、10-35 kg的仔猪多发;饲养管理不善、卫生条件差、饲养密度大、通风换气不好的猪场多发。仔猪感染后可发生死亡,肥育猪多为慢性或隐性。病原体随猪咳嗽、喷嚏及分泌物排出体外,主要通过呼吸道感染健康猪,该病可长期在猪群中流行。猪群发病以慢性型为主,有呼吸道症状的猪占猪群总数的30%以上。
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