常见的几种禽病毒病采样技术

　  在防治畜禽疾病中，很多畜禽传染病的临床症状不明显，单凭临床经验是难以做到确切诊断、准确用药，往往因此而贻误了病情。为此，需要通过从病畜或尸体采取病料，进一步做微生物学和血清学化验，查清病原，进而有针对性地采取相应的防治措施，以达到预防、控制和扑灭传染病的目的，同时减少临床工作的盲目性，提高兽医人员的技术水平，保护养殖户的利益。而病料采集、保存、送检的方法是否正确，直接影响到检验的结果和防治工作的开展，故采集检测样品是诊断检测工作的重要内容，另外采样的时机是否适宜，样品是否具有代表性，样品处理、保存、运送是否及时等，都会影响到检验结果的准确性和可靠性。
　　下面就如何正确地采集、保存、送检病料等进行归纳和整理，希望能够对基层兽医和养殖户提供一些借鉴。
　　一、采集原则
　　1，新鲜、具代表性，且足量：采集死禽样本，夏天6小时之内完成，冬天在24小时之内完成；采集样品的数量要满足诊断检测的需要，并留有余地，以备必要时复检使用。
　　2，减少对病料的污染：在做尸体剖检时，应将尸体浸泡在消毒剂溶液中，防止羽毛及皮屑飞扬对病料造成的污染；病料采集时，对采集病料的器械及容器必须提前消毒，减少因器械或盛放病料的容器对病料的污染；尸体剖开腹腔时，第一时间采取病料，减少病料因暴露于空气中而造成的污染。
　　3，典型采样：选取未经药物治疗、症状最典型或病变最明显的样品，如有并发症，还应兼顾采样。
　　4，合理采样：根据诊断检测的要求，须严格按照规定采集各种足够数量的样品外，不同疫病的需检样品各异，应按可能的疫病侧重采样。对未能确定为何种疫病的，应全面采样。
　　5，安全采样：既要保护采样人员，以要防止病原外泄，还要防止样品受到污染。
　　6，迅速送检：应尽快送实验室进行检测，延误送检时间，会影响到检测质量和结果的可靠性。
　　二、病料的采集方法
　　1，组织和实质器官的采集：剖开腹腔后，必须注意肠管的完整。如需进行细菌的分离培养，要以烧红的手术刀片烫烙脏器表面，使用经火焰灭菌的接种针插入烫烙的部位，提取少量的组织或液体，作涂片镜检或接种于培养基上，进行培养。
　　2，液体病料的采集：采集血液、胆汁、脓肿液、渗出物等液体病料，使用灭菌吸管或注射器，经烫烙部位吸取病变组织的液体，将病料注入灭菌的试管中，塞好棉塞送检。
　　3，全血的采集方法：用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血2-5毫升，注入灭菌试管中。建议加入少量的抗凝剂（3.8%枸橼酸钠0.1-0.5毫升或柠檬酸钠液，配制方法：葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml高压灭菌10磅/10分钟。）
　　4，血清的采集方法：用灭菌注射器自禽的心脏或翅静脉采血2毫升，注入灭菌的1.5ml离心管中摆成斜面，待血液凝固血清析出后，将血清吸出注入另一个灭菌试管中，备用。
　　5，肠道及肠内容物的采集方法：选择病变明显部位的肠道，将内容物弃掉，用灭菌生理盐水冲洗干净，然后将病料放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送检。亦可将肠管切开，用灭菌生理盐水冲洗干净，然后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面，将接种针插入粘膜层，取少量病料接种于培养基上。采集肠内容物则需用烧红的手术刀片烫烙肠道浆膜层，将接种针插入肠道内，吸取少量肠内容，放入试管中或将带有肠内容的肠道两端扎紧，去掉其它部分送检。
　　6，皮肤及羽毛的采集：皮肤要选病变明显部分的边缘，采取少许放入灭菌的试管中送检；羽毛也要选病变明显部分，用灭菌的刀片刮取羽毛及根部的皮屑少许，放入灭菌的试管中送检；采集孵化室的绒毛需用灭菌镊子采取出雏机出风口的绒毛3-5克，放入灭菌的试管中送检。
　　三、各种病料的采集部位

表1 鸡病毒性疾病主要采集的主要部位

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